基因擴增儀起著關(guān)鍵作用--全程實地監(jiān)測
發(fā)布時間：2014-05-19 閱讀：353次
摘要：基因擴增儀熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍，運用該項技術(shù)，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、定量和定性分析。它的關(guān)鍵性作用有什么，具體體現(xiàn)在哪些設(shè)計？
、基因擴增儀定義：
基因擴增儀對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時監(jiān)控反應(yīng)過程。隨著PCR 反應(yīng)的進行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一次熒光強度信號，這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，結(jié)合相應(yīng)的軟件對產(chǎn)物進行分析，可以得到熒光擴增曲線，計算待測樣品初始模版的量。實時熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍，運用該項技術(shù)，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、定量和定性分析。
第二、基因擴增儀起著關(guān)鍵的作用：
所謂real-time Q-PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術(shù)的發(fā)展過程中，兩個重要的發(fā)現(xiàn)起著關(guān)鍵的作用：
1.它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產(chǎn)物成為可能。
2.此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應(yīng)管中能實時地監(jiān)測反應(yīng)全過程。
第三、它的具體體現(xiàn)有：
1.一機多用，無須換樣品座模塊，使用方便。
2.數(shù)量的基因擴增儀反應(yīng)管、反應(yīng)板實驗要求，大大節(jié)省了購買不同模塊備件的費用。
3.采用半導(dǎo)體Peltier熱循環(huán)控溫技術(shù)，控溫、速度快、節(jié)省實驗時間。
4.可調(diào)節(jié)式熱蓋防蒸發(fā)，加樣無油操作，簡單無污染，確保PCR擴增產(chǎn)物后處理的可靠。
5.具有溫度/時間，遞增/遞減等增強功能，可做降落（Touch down）PCR、長（Long）PCR、巢式PCR、NASBA、 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增（LAMP）、連接酶鏈（LOR)、多態(tài)擴增分析等復(fù)雜操作。
6.樣品基座BLOCK和管內(nèi)TUBE模擬兩種控溫模式可選；采用管內(nèi)控溫模式時軟件根據(jù)用戶設(shè)定的擴增反應(yīng)體積， 自動優(yōu)化體積差異和動態(tài)穩(wěn)定，實現(xiàn)佳擴增效果。
為改進提高本方法的自動化水平，有人設(shè)計了機械手裝置，替代上述手工移動標本過程，形成了機械手水浴式基因擴增儀，該改進解決了實驗人員的高強度勞動問題，但又帶來了一個機械手部件大行程頻繁相對運動而引起的高故障。
